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超高效液相色谱其使用一般包括以下步骤

更新时间:2025-02-03      点击次数:197
  超高效液相色谱是一种高效、快速的分析分离技术,通常由高压溶剂输送单元、低死体积的色谱系统、快速的检测器、快速自动进样器和高速数据采集、控制系统等组成。这些组件的协同作用,使得超高效液相色谱能够实现高效、快速、灵敏的分析分离。广泛应用于医药、环保、石化、食品、化工等行业。在医药领域,它可用于药物分析、药物代谢研究等;在环保领域,它可用于水质监测、空气污染物分析等;在石化领域,它可用于石油产品分析、催化剂评价等;在食品和化工领域,它可用于食品添加剂检测、产品质量控制等。
  超高效液相色谱的使用方法一般包括以下步骤:
  1、仪器准备
  清洁:仔细清洁采样室、进样器以及管道等部件,使用纯净溶剂清洗流道,确保系统无杂质污染,同时检查溶剂瓶和毛细管是否清洁,避免对样品造成污染。
  校准:根据实验要求选择合适的校准标准品,并按照制定的方法进行准备,确保校准标准品质量可靠、浓度准确。
  2、开机与参数设置
  开启仪器:依次打开计算机、液相色谱仪主机电源开关,等待仪器自检完成。
  设置参数:在工作站软件中设置泵的流量、压力上限,检测器的波长、灵敏度等参数。设置流动相的比例、流速、柱温等色谱条件,这些参数需要根据待分析的样品和所选用的色谱柱来优化确定。
  3、样品制备与进样
  样品制备:根据样品的性质和分析要求,对样品进行适当的处理,如提取、过滤、稀释等,以确保样品溶液的浓度和纯度符合分析要求,并且不会对色谱柱造成损害。
  进样:将处理好的样品溶液注入进样器中,注意进样量的控制,一般UPLC的进样量较小,通常在微升级别。可以使用手动进样或自动进样器进样。
  4、数据采集与分析
  启动采集:点击工作站软件中的“开始”按钮,启动泵输送流动相,使样品在色谱柱中分离,同时检测器开始采集数据。在数据采集过程中,要密切观察基线的稳定性和色谱峰的分离情况。
  数据分析:数据采集完成后,使用工作站软件对色谱图进行处理和分析。可以对色谱峰进行积分、定性和定量分析,确定样品中各组分的含量和身份。
  5、关机与维护
  关机:分析结束后,先关闭检测器的电源,然后关闭泵的电源,最后关闭计算机。
  清洗维护:使用合适的溶剂冲洗色谱柱和流路系统,以去除残留的样品和流动相,防止堵塞和污染。定期对仪器进行维护保养,检查仪器的性能和部件的运行状况,及时更换磨损或损坏的部件。