液相色谱质谱联用仪(LC-MS)是一种将液相色谱仪与质谱仪联用的现代分析仪器,用于样品的定性定量分析。其工作原理为:样品通过液相色谱分离后的各个组分依次进入质谱检测器,各组分在离子源被电离,产生带有一定电荷、质量数不同的离子。不同离子在电磁场中的运动行为不同,采用质量分析器按不同质荷比(m/z)把离子分开,得到依质荷比顺序排列的质谱图。通过对质谱图的分析处理,可以得到样品的定性和定量结果。
为了确保其正常运行并获得准确的分析结果,
液相色谱质谱联用仪在使用和维护过程中需要注意一系列关键事项。以下是一些注意事项:
1、开机前准备
检查氮气供应:确认氮气畅通,液氮罐压力在0.7~0.8MPa之间。
检查流动相:确保流动相溶剂瓶内液体充足,液面要没过吸滤头。
连接设备:打开UV检测器箱门,将三通与质谱分流接头连接。
2、仪器启动与关闭
开机顺序:按照特定顺序(1 2 3 4 5 6)开启各部件。
关机顺序:关机时需按相反顺序(6 5 4 3 2 1)进行。
3、样品处理与进样
样品前处理:样品需经过适当的前处理,如过滤、稀释等,以避免污染或堵塞离子源及毛细管路。
避免直接进样:未经处理的生物样品不能直接进入HPLC/MS/MS系统,需要设定前弃去时间。
流动相添加剂:流动相中不能含有强酸、强碱和不挥发性的盐,可以含有少量弱酸(甲酸或乙酸),弱碱(氨水),醋酸铵浓度不能高于50mM。
4、日常维护与保养
定期清洁:保持仪器内部和外部的清洁,特别是进样部件及其周围的管线。
检查色谱柱:色谱柱是LC-MS的关键部件之一,需要定期活化和维护。
检查电源和线路:确保供电正常,检查液相色谱部分的压力、流速等参数是否正常设置。
检查质谱部分:检查质谱部分的离子源、质谱扇区等参数是否正常设置。
5、数据处理与解读
正确解读数据:了解质荷比(m/z)的概念,正确解读质谱图,避免错误判断化合物。
结合其他手段:LC-MS仅为辅助检测手段,必要时应结合其他分析手段(如TLC)来确定化合物。
6、故障排查与维修
及时记录故障:在仪器出现故障时,及时记录故障现象和可能的原因,以便后续排查和维修。
联系专业维修人员:对于复杂的故障或不确定的问题,应及时联系仪器供应商或专业维修人员进行处理。