安捷伦1260液相色谱仪是一种高效的分离和分析技术，通过在固定相（色谱柱）和流动相（溶剂）之间相互作用，实现对混合物中成分的分离和检测。HPLC在各种领域的科学研究和工业生产中发挥着重要作用。其基本原理是利用化合物在固定相（通常是填充在色谱柱中的吸附剂）和流动相（溶剂）之间的分配系数差异，实现化合物的分离。样品混合物在色谱柱中受到不同程度的吸附和解吸作用，从而在柱中分离成各个成分。检测器检测这些分离的化合物，并生成相应的信号。
1、流动相准备
溶剂纯度：使用的溶剂必须达到色谱纯（LC）级别。
过滤脱气：所有溶剂在使用前需经过0.45微米滤膜过滤，并通过超声脱气10-20分钟。这有助于去除杂质和溶解的气体，防止气泡影响泵和检测器的性能。
溶剂连接：确保A管连接有机相，B管连接水相，并且溶剂完q浸没吸滤头。
2、设备操作
开机连接：打开HPLC工作站（包括计算机软件和色谱仪），连接好流动相管道和检测系统。
冲洗泵阀：如果长时间未用或更换新的流动相，需先冲洗泵和进样阀。冲洗泵时，直接在泵的出水口用针头抽取溶剂；冲洗进样阀时，在控制界面中点击purge后再点击start，速度不要超过10 ml/min。
调节流量：初次使用新流动相时先测试压力，流速不宜过大，通常不超过2000 psi，然后选择合适的流速并走基线，观察基线情况。
3、方法设计
设定方法：在控制界面选择或创建合适的走样方法，包括进样前的稳流、基线归零、进样阀的loading-inject转换和走样时间。
样品处理：所有样品需经过滤后才可进样。进样后按照设定的方法进行分析，并在完成后记录数据和做标记[postrun]，最后再用基线方法洗掉剩余物。
4、维护保养
环境条件：保持仪器工作环境干净、温度适宜，避免振动和阳光直射。
定期检查：定期检查和维护泵、检测器及管路，确保没有泄漏或堵塞。
清洗部件：定期清洗泵、阀门和检测器等关键部件，保持其清洁无污染。
